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細(xì)胞培養(yǎng)基pH值對(duì)細(xì)胞的影響培養(yǎng)基是用來供給細(xì)胞營養(yǎng),促使細(xì)胞增殖的,也是細(xì)胞賴以生長的環(huán)境。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中用量最多的就是細(xì)胞培養(yǎng)基,雖然細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)基本技術(shù)大同小異,但是每種細(xì)胞的培養(yǎng)條件卻相差甚遠(yuǎn)。若偏離某種細(xì)胞所需的培養(yǎng)條件,則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞表達(dá)不同的表型。一、培養(yǎng)基體系主要成分及功能介紹1、葡萄糖:用于細(xì)胞能量代謝。2、CO?:細(xì)胞需要少量的二氧化碳來維持生長。在培養(yǎng)基中,溶解的CO?與碳酸氫鹽離子處于平衡狀態(tài),許多培養(yǎng)基利用了這種CO?/碳酸氫鹽反應(yīng)來緩沖培養(yǎng)基的pH值...
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各種微生物由于遺傳特性不同,因此適合采用的保藏方法也不一樣。一種良好的有效保藏方法,首先應(yīng)能保持原菌種的優(yōu)良性狀長期不變,同時(shí)還須考慮方法的通用性、操作的簡便性和設(shè)備的普及性。下面介紹幾種常用的菌種保藏方法:1.斜面低溫保藏法將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,待菌種生長完成后,置于4℃左右的冰箱中保藏,每隔一定時(shí)間(保藏期)再轉(zhuǎn)接至新的斜面培養(yǎng)基上,生長后繼續(xù)保藏,如此連續(xù)不斷。此法廣泛適用于細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌等大多數(shù)微生物菌種的短期保藏及不宜用冷凍干燥保藏的菌種。放線...
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培養(yǎng)基作為細(xì)胞的“食物”,是細(xì)胞培養(yǎng)和發(fā)酵的基礎(chǔ),大腸桿菌在不同的培養(yǎng)基中培養(yǎng)可能會(huì)表現(xiàn)出不同的性狀,而利用這些性狀的不同,可將部分菌種進(jìn)行區(qū)分或分離,此外,根據(jù)目標(biāo)菌種選擇合適的培養(yǎng)基可以低成本、穩(wěn)定的高表達(dá)。大腸桿菌分離培養(yǎng)基常見的主要有以下幾種:大腸桿菌分離培養(yǎng)基:主要根據(jù)不同的大腸桿菌在培養(yǎng)基中的生產(chǎn)速度,代謝產(chǎn)物,對(duì)培養(yǎng)基中特定組分的需求利用情況不同等實(shí)現(xiàn)對(duì)不同種類的菌種進(jìn)行分離或篩選。LB固體培養(yǎng)基:是一種主要組分為酵母提取物、胰化蛋白胨、NaCl瓊脂的非選擇性固...
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發(fā)酵工程培養(yǎng)基主要使用發(fā)酵培養(yǎng)基:發(fā)酵培養(yǎng)基是指為了在生產(chǎn)中更加利于菌種代謝產(chǎn)物的生成而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,這類培養(yǎng)基常見的主要有以下幾種:SOB(SuperOptimalBroth)培養(yǎng)基:是一種富營養(yǎng)培養(yǎng)基,其配方為:2%胰蛋白胨,0.5%酵母提取物,10mMNaCl,2.5mMKCl,10mMMgCl2,10mMMgSO4。與LB培養(yǎng)基相比,SOB培養(yǎng)基中含有兩倍多的蛋白胨,富含更多的氨基酸及多肽。此外,SOB培養(yǎng)基中含有鎂離子,鎂離子是高密度培養(yǎng)必須的離子。利用SOB培養(yǎng)基...
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流式細(xì)胞技術(shù)是一項(xiàng)廣為使用、基于激光的生物學(xué)技術(shù),利用流式細(xì)胞儀對(duì)處于快速流動(dòng)的熒光染色的細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析和分選,是當(dāng)代主要的細(xì)胞定量分析技術(shù)之一。主要有以下幾個(gè)特點(diǎn):1.只要樣本制成單個(gè)細(xì)胞或生物顆粒懸液均可以分析。2.測(cè)量速度快,每秒鐘可以測(cè)量數(shù)千個(gè)乃至數(shù)萬個(gè)細(xì)胞3.同時(shí)測(cè)量每個(gè)細(xì)胞的多參數(shù)特征。4.在進(jìn)行細(xì)胞特征分析的同時(shí)可以把有特征細(xì)胞分離出來(分選技術(shù))關(guān)于流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀由三部分構(gòu)成——1.液流系統(tǒng),包括流動(dòng)室和液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng);2.光學(xué)系...
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