細(xì)胞支原體污染的原因有哪些

細(xì)胞支原體污染的原因?qū)τ谏飳?shí)驗(yàn)器材細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)說(shuō)，如何預(yù)防細(xì)胞的支原體污染是每一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)者的都會(huì)考慮的問題，據(jù)統(tǒng)計(jì)，在細(xì)胞污染原因分析中有超過60%的細(xì)胞培養(yǎng)物污染都是由支原體所引起的。那么細(xì)胞支原體污染的原因有哪些呢？細(xì)胞支原體污染的原因主要包括：1.不良操作：如操作者未穿實(shí)驗(yàn)服、未戴口罩、未熏蒸操作臺(tái)等，容易引起污染。支原體一般通過難以追蹤的各種來(lái)源進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)物。其中包括實(shí)驗(yàn)室人員、血清、細(xì)胞培養(yǎng)基、水浴鍋、振蕩培養(yǎng)箱、生物反應(yīng)器、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等。人為污染是上述污染源中...

查看更多

細(xì)胞支原體污染怎么處理

用肉眼或光學(xué)顯微鏡檢測(cè)支原體比較困難，所以支原體檢測(cè)一般會(huì)通過PCR的檢測(cè)、DNA染色、熒光標(biāo)記、瓊脂平板接種等方法來(lái)實(shí)現(xiàn)。在支原體檢測(cè)之前，細(xì)胞應(yīng)連續(xù)培養(yǎng)至少兩周，以便有時(shí)間讓低水平的污染物生長(zhǎng)。對(duì)于測(cè)試，在取樣前至少兩三天內(nèi)不應(yīng)更換培養(yǎng)基。一、培養(yǎng)法在瓊脂平板/肉湯上培養(yǎng)被認(rèn)為是檢測(cè)支原體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。在這種方法中，將細(xì)胞培養(yǎng)物的上清液添加到液體或半固體培養(yǎng)基（含有支原體生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)）中。受感染的細(xì)胞培養(yǎng)物會(huì)在液體肉湯和瓊脂平板上生長(zhǎng)。瓊脂平板上很容易看到支原體菌...

查看更多

細(xì)胞培養(yǎng)試劑選購(gòu)指南

細(xì)胞生物學(xué)研究、創(chuàng)新藥開發(fā)等領(lǐng)域經(jīng)常會(huì)進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)，但是很多實(shí)驗(yàn)員不知道該怎么選購(gòu)細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)試劑，本節(jié)小編帶你初步了解一下細(xì)胞系的選擇技巧、購(gòu)買細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)考慮的因素。一、細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境條件細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要為細(xì)胞創(chuàng)造良好的細(xì)胞的存活和增殖環(huán)境，這樣的環(huán)境條件包括培養(yǎng)溫度、濕度和CO2水平、營(yíng)養(yǎng)成分、酸堿度、滲透壓等。下表為大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)的適宜條件。酸堿度7.0–7.4滲透壓280–320mmol/千克二氧化碳_5–10%溫度35–37°C二...

查看更多

貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)的基本步驟

我們知道開始培養(yǎng)的細(xì)胞不能無(wú)限期地生長(zhǎng)，因?yàn)槭芟迏^(qū)域內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量不斷增加，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也會(huì)被消耗，從而導(dǎo)致有毒的代謝產(chǎn)物增加，另外根據(jù)實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)需要，也要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。通過去除培養(yǎng)基并將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新鮮的生長(zhǎng)培養(yǎng)基和基質(zhì)中，細(xì)胞獲得了新鮮的營(yíng)養(yǎng)并去除了有毒代謝物，從而可以長(zhǎng)期維持培養(yǎng)。這個(gè)過程就屬于傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的細(xì)胞密度會(huì)低于原始培養(yǎng)物中的細(xì)胞密度。當(dāng)接種細(xì)胞后，細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)經(jīng)過滯后期、對(duì)數(shù)期，穩(wěn)定期和凋亡期。在凋亡期，細(xì)胞會(huì)因缺乏營(yíng)養(yǎng)或培養(yǎng)條件不當(dāng)而死亡。貼壁細(xì)胞傳代培...

查看更多

生物安全柜內(nèi)HEPA 和 ULPA 過濾器的區(qū)別

過濾器是生物安全柜的重要組成部分。了解過濾器的工作原理、維護(hù)級(jí)別以及過濾器需要多久更換一次，這些都是購(gòu)買生物安全柜時(shí)需要考慮的因素。那么生物安全柜中的HEPA和ULPA過濾器有什么區(qū)別呢？生物安全柜中使用的過濾器，一般為高效微粒空氣(HEPA)過濾器和超低滲透(ULPA)過濾器，HEPA和ULPA過濾器有什么區(qū)別呢？HEPA和ULPA過濾器的結(jié)構(gòu)及其工作原理從結(jié)構(gòu)和化學(xué)角度來(lái)說(shuō)，HEPA和ULPA過濾器非常相似。這些過濾器用于生物安全柜，其中氣流（由電機(jī)驅(qū)動(dòng)）攜帶有害氣體和顆...

查看更多