CRISPR/Cas9 基因編輯和NGS驗證

CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)需要通過下一代測序(NGS)來驗證，能夠在核苷酸水平分辨率下進(jìn)行大規(guī)模評估基因編輯的準(zhǔn)確性和可靠性。高效、可自動化和可擴(kuò)展的CIRCLE-seq是一種體外NGS測定，可以對CRISPR介導(dǎo)的切割進(jìn)行靈敏的脫靶檢測。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)CRISPR代表成簇規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序列。這些重復(fù)的DNA片段最初來源于病毒病原體，并作為模板將CRISPR相關(guān)蛋白9(Cas9)核酸內(nèi)切酶引導(dǎo)至新入侵的病毒。當(dāng)Cas9遇到同源病毒序列時，它會...

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HE染色實驗中常見問題及應(yīng)對措施

HE染色實驗常見問題及解決方案HE染色是石蠟切片技術(shù)中常用的染色方法之一，簡稱為蘇木精-伊紅染色法。該方法使用堿性的蘇木精染液將細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)和胞質(zhì)內(nèi)的核酸染成紫藍(lán)色，同時使用酸性染料伊紅將細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分染成紅色。1、切片出現(xiàn)白色斑點原因：(1)烘片溫度過低，導(dǎo)致玻片未干透；(2)切片在二甲苯中停留時間過短；(3)二甲苯使用時間過長，導(dǎo)致脫蠟不效果不好。對策：若玻片未干透，先用無水乙醇去除水分，再重新脫蠟。若斑點是由于停留時間過短或使用時間過長造成的，則需重新操...

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穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選步驟

穩(wěn)定細(xì)胞株是一種常用于基因表達(dá)、藥物篩選和蛋白質(zhì)表達(dá)等領(lǐng)域的工具。但是，穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選需要經(jīng)過一系列的步驟和實驗，下面介紹一下穩(wěn)定細(xì)胞株篩選的兩種方法和穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選簡要步驟：一、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染法先把質(zhì)粒整合到染色體上后，用相應(yīng)的質(zhì)粒DNA中的抗性標(biāo)志來篩選該細(xì)胞系，單克隆篩選穩(wěn)定細(xì)胞株。1、篩選濃度測定，以10~14天細(xì)胞全部死亡的抗生素濃度為篩選濃度；2、進(jìn)行細(xì)胞接種，轉(zhuǎn)染實驗前天接種細(xì)胞，各種細(xì)胞的平板密度依據(jù)各種細(xì)胞的生長率和細(xì)胞形狀而定。進(jìn)行轉(zhuǎn)染當(dāng)天細(xì)胞密度應(yīng)達(dá)到60...

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紫外可見分光光度計操作標(biāo)準(zhǔn)SOP

紫外可見分光光度計操作維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)SOP1.0適用范圍：本規(guī)程適用于制藥行業(yè)質(zhì)量控制實驗室安裝的紫外可見分光光度計操作維護(hù)和清潔標(biāo)準(zhǔn)2.0職責(zé)：QC員：負(fù)責(zé)儀器的操作和維護(hù)。QC負(fù)責(zé)人/經(jīng)理：負(fù)責(zé)儀器操作標(biāo)準(zhǔn)程序的問責(zé)制和有效實施。3.0定義-分光光度計：測量樣品在固定波長或較寬波長掃描范圍內(nèi)的吸光度，并在單色光束通過樣品時產(chǎn)生光譜的裝置。4.0紫外可見分光光度計操作步驟：4.1操作前確保儀器清潔并校準(zhǔn)。打開儀器和與儀器連接的計算機(jī)的主電源。4.3接通電源后，分光光度計開始初始化...

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塑料離心管和玻璃離心管選購指南

市場上常見離心管主要分為兩種：即：塑料離心管和玻璃離心管，也有少數(shù)是鋼制離心管。那么這些不同材質(zhì)的離心管有什么區(qū)別呢?下面小編就來介紹一下塑料離心管和玻璃離心管的區(qū)別。玻璃離心管玻璃離心管是由玻璃制成的，不同廠家可能使用的玻璃成分不同，所以強(qiáng)度上可能會略有差異。我們的普通玻璃試管可以承受的相對離心力(RCF)通常小于3000g，而硼硅玻璃管一般可以承受超過10000g以上的相對離心力。但由于玻璃離心管質(zhì)量易碎，所以玻璃管一般不用于高速離心機(jī)，用得也不多。由于玻璃本身的特性，它...

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