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如何選擇移液槍移液吸頭如何選擇實(shí)驗(yàn)室移液吸頭?任何移液器,其性能和精確度都會(huì)因使用質(zhì)量不佳或不合適的吸頭而受到嚴(yán)重影響。移液器和移液器吸頭作為一個(gè)系統(tǒng),只有互相匹配才能保證準(zhǔn)確地轉(zhuǎn)移和輸送液體。在掌握正確的移液技術(shù)后,匹配推薦的吸頭,就能保證移液的精度。一般分為:①袋裝吸頭、②盒裝吸頭、③低吸附吸頭、④濾芯吸頭、⑤自動(dòng)化吸頭等。透明吸頭VS.有色吸頭當(dāng)前,市場(chǎng)上吸頭基本上都是用聚丙烯塑料(化學(xué)惰性高,使用溫度范圍廣的無色透明塑料)做的。不過,同樣是聚丙烯,品質(zhì)差別也會(huì)很大:高...
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如何選購合適的PCR耗材PCR耗材包括PCR管(EP管)、8連排管、96孔PCR板、深孔板等這些材質(zhì)一般為聚丙烯PP材質(zhì),具有高品質(zhì)、高純度、高透明的特點(diǎn),一般都在潔凈空間生產(chǎn)加工。PCR耗材為什么一般都是PP材質(zhì)的呢,為什么需要環(huán)境潔凈?因?yàn)镻CR/qPCR耗材通常會(huì)與試劑或樣品直接接觸,而聚丙烯(PP)材質(zhì)是生物學(xué)惰性材料,表面不易于粘附生物分子,且有著良好的化學(xué)耐性,及溫度耐受性(可以121℃高壓滅菌,也可以承受熱循環(huán)過程中的溫度變化)。這里強(qiáng)調(diào)一下耗材質(zhì)量(是否干凈)...
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實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)中常見問題匯總實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)(real-timePCR)也叫qPCR(QuantitavePCR),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)累積實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過特定數(shù)學(xué)原理對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。它是一項(xiàng)臨床上非常成熟的技術(shù),目前在分子生物學(xué)領(lǐng)域,qPCR核酸定量的主要方法。目前仍在全球肆虐的病毒鑒定的“金標(biāo)準(zhǔn)”——核酸檢測(cè)就是通過qPCR原理進(jìn)行的。那么拿到一個(gè)樣本,需要經(jīng)過以下多項(xiàng)操作流程才能定量檢測(cè)到它的核酸含量。其中...
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使用生物反應(yīng)器研究乳腺癌亞型細(xì)胞外囊泡產(chǎn)生技術(shù)使用傳統(tǒng)體外方法生產(chǎn)的EV的深入表征和驗(yàn)證由于需要大面積的細(xì)胞單層和大量的培養(yǎng)基,培養(yǎng)可能具有挑戰(zhàn)性。該實(shí)驗(yàn)方法使用貼壁細(xì)胞生物反應(yīng)器系統(tǒng)以節(jié)省空間、資源和時(shí)間的方式同時(shí)培養(yǎng)多種不同亞型的乳腺癌細(xì)胞系,從而能夠持續(xù)生產(chǎn)大量用于下游實(shí)驗(yàn)的EV。一、生物反應(yīng)器接種、適應(yīng)和維護(hù)培養(yǎng)基A:含有10%胎牛血清(FBS,Merck)和1%青霉素/鏈霉素(PS,Gibco)的DMEM(Gibco)。培養(yǎng)基B:AdvancedDMEM/F-12(...
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細(xì)胞培養(yǎng)常見問題匯總1冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂。2細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí),是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO即可,如此可避免大部分解凍后...
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